Sterilni farmaceutski proizvodi se mogu svrstati uterminalno sterilizirani proizvodi, koji prolaze terminalnu sterilizaciju tokom proizvodnje, iaseptično proizvedeni proizvodi, u kojem se dio ili cijeli proizvodni proces izvodi u aseptičnim uvjetima.

Kad god je to moguće, sterilne proizvode treba proizvoditi koristećiterminalna toplotna sterilizacija. Međutim, za proizvode{1}}osjetljive na toplinu,aseptična obradailisterilna filtracijamogu se usvojiti kao alternativne metode sterilizacije.

Thetrovalentna vakcina protiv rotavirusaje živa atenuirana vakcina koja se ne može podvrgnuti terminalnoj sterilizaciji. Kako bi se osigurala efikasnost proizvoda, cijeli proizvodni proces se odvija u aseptičnim uvjetima. Ovo značajno povećava operativnu složenost i zahtijeva visoko kvalifikovano proizvodno osoblje.

Priprema međuprodukta za vakcinu je jedna od najkritičnijih faza u formulaciji vakcine. Sterilnost ovog procesa direktno utiče i na sigurnost finalnog proizvoda i na ukupne troškove proizvodnje. Stoga, uključivanje akorak sterilne filtracijetokom međupripreme je od velikog značaja za osiguranje kvaliteta proizvoda uz smanjenje rizika od kontaminacije.

Efikasna daljnja prerada postala je jedan od glavnih izazova s ​​kojima se suočava brzo rastuća biofarmaceutska industrija. Relativno velika veličina čestica virusa i virusa{1}}sličnih čestica (približno100–400 nm) dodatno povećava složenost sterilne filtracije.

 

 

 

Ova studija se sastojala oddvije fazelaboratorijskih{0}}eksperimenata filtracije na trovalentnim poluproizvodima vakcine protiv rotavirusa kako bi se preliminarno procijenio učinak uvođenja koraka sterilne filtracije tokom pripreme međuprodukta.

Tokomprva faza, titri virusa prije i nakon filtracije su procijenjeni korištenjem različitih veličina membranskih pora i membranskih materijala.

 

Na osnovu povoljnih rezultata dobijenih u Fazi I,druga fazakoristili sterilne filtere sa istim materijalom membrane i veličinom pora, dok su proširivali i eksperimentalnu skalu i broj proizvodnih serija. Procijenjeni su titri virusa i fizičko-hemijska svojstva prije i nakon filtracije. Osim toga, na odabranoj membrani su obavljeni testovi zadržavanja bakterija kako bi se utvrdilo da li će trovalentna vakcina protiv rotavirusa utjecati na performanse zadržavanja bakterija filtera.

Filtracijska membrana korištena u ovoj studiji bila je a0,22 μm poliviniliden fluorid (PVDF) membrana. Ispitivani su efekti sterilne filtracije na titar virusa, izgled, pH, osmolalnost i bistrinu, a također je procijenjena performansa retencije bakterija.

Rezultati su to pokazali0,22 μm PVDF sterilni filteriimaonema značajnog efektana titar virusa, izgled, pH ili osmolalnost trovalentnog intermedijera vakcine protiv rotavirusa. Međutim, oniznačajno poboljšana jasnoća proizvoda, što ukazuje da sterilna filtracija može efikasno poboljšati kvalitet proizvoda bez ugrožavanja potentnosti vakcine.

 

Tabela 1. Poređenje titara virusa prije i poslije filtriranja u šest srednjih serija (I faza)

 

 

Tabela 2. Statistička analiza titara virusa prije i poslije filtriranja u šesnaest srednjih serija (faza II)

 

 

 

Tabela 3. Sažetak parametara za test zadržavanja bakterija

 

 

Napomena:1.Ukupni volumen filtracije=Minimalni protok × vrijeme recirkulacije + Konačna zapremina filtracije.

 

Tabela 4. Rezultati testa zadržavanja bakterija

 

 

napomene:

1. Nivo membranskog izazova=Konačna koncentracija bakterijske suspenzije × Konačna zapremina filtracije / Efektivna površina filtracije (13,8 cm²).

2.TNTCukazuje da je broj kolonija biopreviše brojno da bi se moglo računati (TNTC).

 

Diskusija

Mediji za filtriranje, uslovi procesa i sterilni filteri su tri primarna faktora koji utiču na performanse sterilizacione filtracije. Odabir membranskog materijala koji odgovara karakteristikama trovalentnog intermedijera vakcine protiv rotavirusa i odgovarajućim uvjetima procesa je osnovni preduvjet za uspješnu sterilnu filtraciju.

Hidrofilnapoliviniliden fluorid (PVDF)membrane se široko koriste u biofarmaceutskoj industriji za terminalnu sterilizaciju filtracije zbog svojevisoka propusnost, visoka brzina protoka, niska svojstva vezivanja-bjelančevina, minimalna ekstrakcija i odlična hemijska kompatibilnost. Rezultati ove studije dalje pokazuju da je odabrana PVDF membrana dobro prilagođena karakteristikama međuprodukta trovalentne rotavirusne vakcine. Sterilna filtracija pomoću ove membrane je imalanema značajnog efektana titar virusa ili fizičko-hemijska svojstva, uključujući izgled, pH i osmolalnost, dokznačajno poboljšava jasnoću proizvoda, čime se doprinosi poboljšanju kvaliteta vakcine.

 

Titar virusa je jedan od najkritičnijih atributa kvaliteta za virusne vakcine, koji služi kao direktan pokazatelj potencijala proizvoda i ukupnog kvaliteta. Shodno tome, predstavlja najvažniji parametar pri ocjeni utjecaja sterilne filtracije.

 

Rezultati dobiveni od ukupno22 intermedijarne serije filtracijepokazao da je preliminarni proces filtracije koji koristi a0,22 μm PVDF membranau potpunosti zadovoljio zahtjeve proizvoda za titreG2, G3 i G4 sojevi virusa, kao i ukupni kombinovani titar virusa.

 

Prethodne studije su izvijestile da sterilna filtracija može biti važan uzrok gubitka titra virusa i da je koncentracija virusa jedan od faktora koji utječu na učinak filtracije. U ovoj studiji, intermedijeri s različitim rasponima titra virusa podvrgnuti su sterilnoj filtraciji. Rezultati su pokazali da je došlo do filtracijenema statistički značajnog smanjenja titra virusau sljedećim rasponima koncentracija:

• faza I:4,50–7,80 lgCCID₅₀/mL
• faza II:4,70–8,10 lgCCID₅₀/mL

Ovi nalazi sugeriraju da se sterilna filtracija može provesti bez ugrožavanja snage vakcine u procijenjenim rasponima koncentracije virusa.

Izložena trovalentna vakcina protiv rotavirusanema baktericidnu aktivnostprotivBrevundimonas diminutaATCC 19146. Na osnovu ovog zapažanja, sprovedena je studija retencije bakterija.

Rezultati su pokazali da vakcina protiv rotavirusanije negativno utjecalo na performanse 0,22 μm hidrofilne PVDF sterilizacijske-membrane. Membrana je uspješno postigla standard filtracije -klase sterilizacijeVeće ili jednako 1,0 × 10⁷Brevundimonas diminutaATCC 19146 ćelija po cm² efektivne površine filtracije, potvrđujući da formulacija cjepiva ne ugrožava sposobnost zadržavanja bakterija filtera za sterilizaciju.

 

 

Referenca

Tong, Y., Chen, T., Fu, S.,et al. Preliminarna primjena sterilne filtracije u procesu proizvodnje trovalentne vakcine protiv rotavirusa. Chinese Journal of Pharmaceuticals, 2024, 55(1):120–124. DOI:10.16522/j.cnki.cjph.2024.01.016.